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電磁裂解水提取工藝優化-KQ5200DE的使用!

返回列表 來源:未知 發布日期:2019-10-10 09:30【

柴胡始載于《神農本草經》,為傘形科植物柴胡(Bupleurum chinense DC.)或 狹 葉 柴 胡(Bupleurum scorzonerifolium Willd.)的干燥根,被列為上品,是具有一種 2 000多年藥用歷史的傳統中藥,具有和解退熱、疏肝解 郁、升舉陽氣之功效 。現代藥理學研究表明,柴胡具 有抗炎、抗病毒、保肝、降血脂、免疫調節等作用 ,臨床 常用含柴胡的藥物有柴胡口服液、柴胡注射液、柴胡片、 柴胡滴丸等。柴胡主要含皂苷類、黃酮類、多糖類、揮發 油類等成分 ,其中皂苷類成分是其藥效物質基礎之 一,主要成分柴胡皂苷a和柴胡皂苷d也是柴胡含量測 定的指標性成分。

1 材料

1.1 儀器

1260 型 HPLC 儀,包括四元梯度泵、可變波長掃描 紫外檢測器、自動進樣器、色譜工作站(美國 Agilent 公 司);KQ5200DE型超聲波清洗器(昆山舒美超聲儀器有限公司);電磁裂解儀(長春中醫藥大學中藥藥劑實驗室 自制,專利號:ZL201721353456.1);L-204型萬分之一電子分析天平、AB135-S 型十萬分之一電子分析天平(瑞 士Mettler-Toledo公司)。

1.2 藥品與試劑

柴胡皂苷 a 對照品(批號:P03M9F50593,純度:≥ 98%)、柴胡皂苷d對照品(批號:Z08A8L33357,純度:≥ 98%)均購自中國食品藥品檢定研究院;乙腈為色譜純, 其他試劑均為分析純,水為超純水。

1.3 藥材

柴胡飲片(批號:171101)購于酒泉市培豐中藥材生 態種植加工有限公司,經長春中醫藥大學藥學院翁麗麗 教授鑒定為柴胡(B. chinense DC.)的干燥根。

2 方法與結果

2.1 柴胡水提液中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d的含量測定

采用 HPLC 法測定柴胡水提液中柴胡皂苷 a、柴胡 皂苷d的含量。

2.1.1 色譜條件

色譜柱:SB-C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脫(0~50 min, 25%A→90%A;50~55 min,90%A);柱溫:40 ℃;流速: 1.0 mL/min;檢測波長:210 nm;進樣量:10 μL。在該色 譜條件下,各成分分離度均大于2.5,理論板數以柴胡皂 苷a、柴胡皂苷d計均不低于35 000,陰性溶液對測定無 干擾,詳見圖2。

2.1.2 混合對照品溶液的制備

取柴胡皂苷a對照品、 柴胡皂苷d對照品各適量,精密稱定,置于同一25 mL量 瓶中,加甲醇溶解并定容,制成柴胡皂苷 a、柴胡皂苷 d質量濃度分別為 202.80、202.00 μg/mL 的混合對照品 溶液。

2.1.3 供試品溶液的制備

取藥材樣品適量,粉碎后過 篩(目數參考最優工藝),精密稱取300.0 g,置于電磁裂 解儀中,按設定的試驗條件加入一定比例的水提取,濾 過,取濾液3.0 mL,60 ℃揮干,置于10 mL量瓶中,加甲 醇溶解并定容,搖勻,即得。

3 討論

本研究采用 HPLC 法測定了以電磁裂解法提取的柴胡水提液中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量,該方法 精密度、穩定性、重復性均較好,可用于同時測定柴胡水 提液中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量。采用單因素試 驗對影響柴胡皂苷a和柴胡皂苷d提取的4個因素即提 取次數、提取時間、物料粒度、料液比進行優化。綜合考 慮單因素試驗結果及節能、省時、經濟等因素,確定提取 次數為 1 次,僅對其余 3 個因素通過 Box-Behnken 響應 面法進行優化,得到最優提取工藝為提取時間2.50 min、 過80目篩、料液比1 ∶ 28(g/mL)。驗證試驗得總提取率為 8.42 mg/g。與超聲法和煎煮法相比,電磁裂解法提取的 總提取率最高,提取時間最短。

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