穿心蓮藥材 Andrographis Herba 為爵床科植 物穿心蓮 Andrographis paniculata (Burm. f.) Nees 的干燥地上部分，主要含有穿心蓮內酯、新穿心蓮 內酯、去氧穿心蓮內酯、14-去氧-11,12-二去氫穿 心蓮內酯（又稱脫水穿心蓮內酯素）、穿心蓮苷（又 稱穿心蓮內酯苷）及新穿心蓮內酯苷元等二萜內酯 類成分，具有抗菌、消炎、抗病毒、抗腫瘤等藥理 活性，主要分布于廣西、廣東、福建、湖南、 四川等地，由于各地的生態環境條件及藥材栽培管 理、采收加工方式的不同導致市場上穿心蓮藥材質 量的差異較大。研究表明，不同來源的穿心蓮 藥材中穿心蓮內酯類成分含量變化較大，《中國 藥典》2015 年以穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內 酯的總量不低于 0.8% 作為穿心蓮藥材質量考察 指標；但僅用二者含量控制和評價穿心蓮藥材及其 制劑的質量，難以全面反映其藥材質量等級及優 劣。目前穿心蓮藥材尚沒有統一的等級標準，難于 區分其質量優劣等級。因此，開展穿心蓮藥材等級 標準研究，對穿心蓮規范化生產和標準化具有十分 重要的意義。但如何評級穿心蓮藥材的等級，迄今 為止，文獻并無具體方法的研究報道。傳統意義上 對穿心蓮藥材鑒別是以外觀質量為依據的“辨狀論 質”，而現代評價則多以藥效成分穿心蓮內酯和脫 水穿心蓮內酯含量為主，如果僅以其中一種方法判 斷其質量優劣則有失偏頗，只有全面地結合其外觀 質量性狀和內在品質等多個方面的影響因素進行 綜合評價，才能有效地判定其質量等級。本研究以 不同產地的穿心蓮藥材為研究對象，將傳統的外觀 質量性狀和內在活性成分等指標相結合，采用統計 學、化學計量學等方法，開展了穿心蓮藥材的質量 等級評價研究，建立了穿心蓮藥材的質量等級快速 評價模型，為穿心蓮藥材等級評價及等級質量標準 的制定提供了新思路，為其他中藥材的等級標準制 定提供參考。

穿心蓮藥材采自廣東（S1～S25）、廣西（S26～ S30、S36）、福建（S31～S35）共 36 批，經廣東藥 科大學中藥學院曾令杰教授鑒定為穿心蓮 Andrographis paniculata (Burm. f.) Nees。

對照品穿心蓮內酯（批號 L23S6Y3682）、新穿心 蓮內酯（批號 Y27J8S40807）、去氧穿心蓮內酯（批 號 Y26D6S7349）購自上海源葉生物科技有限公司； 脫水穿心蓮內酯（批號 J1020AS）購自大連美倫生物 技術有限公司，質量分數均大于 98%。乙腈為色譜純， 其他試劑均為分析純。島津 LC-20AT HPLC 色譜儀， Agilent 5 TC-C18（2）色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），KQ5200DE 數控超聲波清洗儀（昆山舒美儀器有限公司），BP211D 電子天平（德國賽多利斯公司）。

根據傳統的經驗鑒別方法，選取穿心蓮藥材的 葉含量（葉質量占藥材總質量的百分比）、分枝數、 株高、莖直徑（上、中、下 3 個部位）、莖顏色、 葉顏色、質地等作為穿心蓮外觀性狀指標進行量化 測定。隨機抽取穿心蓮樣品每批次 20 株，分離出 其葉、莖及雜質，分別稱定質量，計算其葉質量占 總質量的百分比，作為葉含量；測量其植株的高度， 即完整植株莖基部（莖的最下部 1 cm 處）到頂部 （莖的最上部 1 cm 處）的距離，作為株高，精確至 0.01 cm；采用游標卡尺測量植株莖基部直徑（莖的 最下部 1 cm 處）、中部直徑（株高的 1/2 處）、上部 直徑（莖的最上部 1 cm 處），精確至 0.01 mm；記 錄完整植株的一級分枝的數目作為分枝數；描述并 記錄其莖的顏色、葉的顏色、質地等性狀。 對上述性狀進行數量分類學的性狀編碼處理： 數值性狀（株高、莖基部直徑、莖中部直徑、莖上部直徑、分枝數、葉含量）無需編碼，直接取其測 量值的平均值；二元性狀（質地脆與否）按“0”（否）、 “1”（是）編碼；有序多態性狀，按“0、1、2、3…” 編碼（莖、葉顏色黃色賦值“0”，黃綠“1”，灰綠 “2”，綠“3”，墨綠“4”）。

穿心蓮醇溶性浸出物參照《中國藥典》2015 年版 四部通則項下的熱浸法，用乙醇作溶劑測定。 研究表明穿心蓮地上部分的主要藥效成分為二 萜內酯類化合物，其中以穿心蓮內酯、新穿心蓮內酯、 去氧穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯為其主要有效成 分。故本實驗以這 4 種二萜內酯為指標采用 HPLC 測 定其含量。色譜條件：流動相為乙腈-水（33∶67） 等度洗脫 40 min，體積流量為 1 mL/min，柱溫為室溫， 檢測波長為 223 nm。參照《中國藥典》2015 年版穿心蓮項下的規定制備供試品溶液和對照品溶液，按上 述條件進行方法學考察（線性關系、精密度試驗、重 復性試驗、穩定性試驗、加樣回收率試驗），計算相 關系數 r、平均加樣回收率和 RSD，結果表明此方法 的線性關系（r＞0.999）、回收率、重復性、穩定性和 儀器精密度（RSD 均小于 3%）均較好。按照上述條 件測定穿心蓮樣品中 4 種內酯的含量。 2.3 數據分析 利用 SPSS 23.0 軟件做統計描述和相關性分析； 用 SIMCA-P 14.0 軟件進行主成分分析（PCA）、系統 聚類分析（HCA）、偏最小二乘判別分析（PLS-DA） 和偏最小二乘回歸分析（PLS）等數據處理分析。不 同批次的穿心蓮樣品的質地均一致，因此，“質地” 這個指標不作為分級參考指標。各批次穿心蓮藥材的 性狀指標和內在質量指標的結果見表 1。

2.3.1 穿心蓮外觀性狀指標和內在質量指標的相關性分析

利用 SPSS 23.0 軟件對包括外觀性狀和 內在指標在內的 14 個指標進行統計描述和相關性 分析。 可知分枝數、莖中部 直徑的 RSD 為 9.44%、10.82%較小，說明各批次間 差異較小。可知莖中部直徑除與莖上部直徑 相關外，與其他指標無明顯相關，故莖中部直徑不 適合作為劃分穿心蓮等級的指標；分枝數雖然 RSD小，但與其他外觀性狀（如莖基部直徑）和內在指 標（穿心蓮內酯含量、新穿心蓮內酯含量）相關性 較高，因此，保留其作為評價指標。其他指標之間 均存在著較為明顯的相關性，根據傳統鑒別經驗及現代研究，其他指標均可作為評價穿心蓮質量等級的重要指標，應保留。

本研究探討了穿心蓮藥材性狀指標與內在化 學品質的相關性，通過主成分聚類分析初步將穿心 蓮藥材分為 3 個等級，通過 PLS 建立了穿心蓮藥材等 級分類的預測模型：藥材等級 Y＝3.761－0.020×葉 含量－0.388×穿心蓮內酯含量－1.117×新穿心蓮內 酯含量－0.274×去氧穿心蓮內酯含量－0.287×脫水穿心蓮內酯含量－0.302×4 個內酯總量－0.104×醇 溶性浸出物含量－0.015×莖顏色－0.008 4×葉顏 色－0.003×莖基部直徑＋0.020×分枝數＋0.137× 莖上部直徑＋0.011×株高，若 Y 在 0.7～1.3，則預測 穿心蓮藥材為一等品，若 Y 在 1.7～2.3，則預測為二 等品，若 Y 在 2.7～3.3 則預測為合格品。本研究表明 穿心蓮藥材等級與新穿心蓮內酯含量、醇溶性浸出物 含量、4 個內酯總量、葉含量、穿心蓮內酯含量顯著 相關，與株高和分枝數相關，其中新穿心蓮內酯含量、 醇溶性浸出物含量、4 個內酯總量、葉含量、穿心蓮 內酯含量這 5 個指標含量越高；分枝數較少、株高較 小穿心蓮藥材的等級越優。